根癌农杆菌介导遗传转化稻曲病菌

中国水稻科学

根癌农杆菌介导遗传转化稻曲病菌

张震;杜新法*;柴荣耀;毛雪琴;邱海萍;王艳丽;王教瑜;孙国昌*

浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所，浙江杭州 310021； *通讯联系人， E-mail：duxf@zaas.org； sungc@zaas.org

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2006-07-10 发布日期:2006-07-10

Agrobacterium tumefaciens-Mediated Transformation of the Pathogen of Ustilaginoidea virens

ZHANG Zhen , DU Xin-fa , CHAI Rong-yao , MAO Xue-qin , QIU Hai-ping , WANG Yan-li , WANG Jiao-yu , SUN Guo-chang

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2006-07-10 Published:2006-07-10

摘要/Abstract

摘要： 利用根癌农杆菌介导转化系统，通过潮霉素抗性筛选转化子，对稻曲病菌分生孢子进行了转化。农杆菌经乙酰丁香酮预先诱导，转化效率大约为390~450个转化子/ 106个孢子。PCR检测绿色荧光蛋白基因和潮霉素基因表达盒，结果显示被测转化子基因组中均成功整合了目的基因片段。同时，在488 nm下这些转化子都具有荧光。表明利用根癌农杆菌可以成功转化稻曲病菌。

关键词: 稻曲病菌, 根癌农杆菌

Abstract:

Conidia of Ustilaginoidea virens were transformed by a Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation(AtMT) system using a binary plasmid vector pBIG2RHPH2-GFP-GUS including HPH gene.AtMT yielded stable hygromycin B-resistant clones(average 390-450 per 10⁶conidia),after pre-culture strain C58C1 with acetosyringone(AS).The presence of the fragment of EGFP gene and HPH gene cassette in the transformants were checked by PCR method,and all tested transformants showed EGFP fluorescence in mycelium under 488 nm wavelength.It suggested that Ustilaginoidea virens was successfully transformed by AtMT method.

Key words: Ustilaginoidea virens, Agrobacterium tumefaciens, transformation

张震,杜新法,柴荣耀,毛雪琴,邱海萍,王艳丽,王教瑜,孙国昌. 根癌农杆菌介导遗传转化稻曲病菌[J]. 中国水稻科学 2006,20(4): 440-442 . .

ZHANG Zhen ,DU Xin-fa ,CHAI Rong-yao ,MAO Xue-qin ,QIU Hai-ping ,WANG Yan-li ,WANG Jiao-yu ,SUN Guo-chang. Agrobacterium tumefaciens-Mediated Transformation of the Pathogen of Ustilaginoidea virens[J]. Chinese Journal of Rice Science 2006,20(4): 440-442 ..

[1]	张佳, 王慧杰, 何正权, 刘文真. 农杆菌介导的籼稻9311和华占遗传转化体系的研究[J]. 中国水稻科学, 2023, 37(2): 213-224.
[2]	伏荣桃, 王剑, 陈诚, 赵黎宇, 陈雪娟, 卢代华. 水稻幼穗响应稻曲病菌毒素胁迫早期的转录组分析[J]. 中国水稻科学, 2022, 36(5): 447-458.
[3]	丁慧, 俞咪娜, 王亚会, 于俊杰, 尹小乐, 薄惠文, 黄星, 刘永锋. 稻曲病菌T-DNA插入突变体B2510的插入位点分析[J]. 中国水稻科学, 2016, 30(5): 541-551.
[4]	王亚会, 刘永锋, 陆凡, 俞咪娜, 黄磊, 郑梦婷, 于俊杰, 尹小乐. 稻曲病菌T-DNA插入突变体B1464插入位点分析[J]. 中国水稻科学, 2015, 29(3): 311-318.
[5]	饶玉春1,2,#,丁正中1,3,#,陈析丰1,曾大力2,马伯军1,顾志敏1,* . 稻曲病菌UvHog1基因的克隆及表达分析[J]. 中国水稻科学, 2014, 28(1): 9-14.
[6]	顾志敏1,2,丁正中1,陈析丰1,郭龙彪2 ,曾大力2 ,钱前2,* ,马伯军1,* . 实时荧光定量PCR筛选稻曲病菌内参基因[J]. 中国水稻科学, 2012, 26(5): 615-618.
[7]	郑静1，2 ,张震2，* ,姜华2 ,王艳丽2 ,柴荣耀2 ,邱海萍2 ,毛雪琴2 ,王教瑜2 ,杜新法2 ,赖朝晖3 ,孙国昌2，*. 稻曲病菌分生孢子实时PCR定量检测方法的建立及初步应用[J]. 中国水稻科学, 2012, 26(4): 500-505.
[8]	王娜1,任佐华1,邓林伟2,陈娟芳3 ,刘二明1，*. 稻曲病菌休眠与非休眠厚垣孢子胞壁多糖结构与组分[J]. 中国水稻科学, 2012, 26(3): 356-360.
[9]	祭芳,曹欢,徐剑宏,殷宪超,史建荣*. 高效液相色谱串联质谱法定量检测稻谷中的稻曲病菌毒素A和D[J]. 中国水稻科学, 2012, 26(2): 246-250.
[10]	杨迎青,杨媚,李明海,李勇,贺晓霞,周而勋. 根癌农杆菌介导的水稻纹枯病菌转化系统的建立 [J]. 中国水稻科学, 2010, 24(6): 617-622 .
[11]	刘连盟,王玲,黄雯雯,刘恩勇,黄世文. 水稻稻曲病菌G蛋白β亚基基因的克隆、表达与序列分析[J]. 中国水稻科学, 2010, 24(4): 353-359 .
[12]	刘朋娟,王政逸,王秋华,李德葆. 农杆菌介导的稻瘟病菌转化及致病缺陷突变体筛选[J]. 中国水稻科学, 2006, 20(3): 231-237 .
[13]	张君成, 张炳欣, 陈志谊, 刘永锋, 陆凡. 稻曲病的接种方法及其效果初探[J]. 中国水稻科学, 2003, 17(4): 390-392 .
[14]	于恒秀 , 刘巧泉 , 陈秀花 , 陆美芳 , 王兴稳 , 王宗阳 , 顾铭洪 ,. 根癌农杆菌介导的水稻转化系统的优化及转反义Wx基因植株的获得[J]. 中国水稻科学, 2002, 16(4): 304-310 .
[15]	周永力,章琦. 稻曲病菌分离技术的初探[J]. 中国水稻科学, 1999, 13(3): 186-188 .