中国水稻科学
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中国水稻科学  2008, Vol. 22 Issue (2): 118-124     DOI:
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水稻种子脂氧合酶基因OsLOX1的原核表达、纯化及鉴定
汪仁1; 沈文飚1; 江玲1; 刘玲珑1; 翟虎渠2; 万建民1, 2, *
1南京农业大学 作物遗传与种质创新国家重点实验室/江苏省植物基因工程研究中心, 江苏 南京 210095; 2中国农业科学院 作物科学研究所, 北京 100081; *通讯联系人, E-mail: wanjm@njau.edu.cn
Prokaryotic Expression,Purification and Characterization of a Novel Rice Seed Lipoxygenase Gene OsLOX1
WANG Ren , SHEN Wen-biao , JIANG Ling , LIU Ling-long , ZHAI Hu-qu , WAN Jian-min
 全文: PDF (3517 KB)   HTML (1 KB)   输出: BibTeX | EndNote (RIS)      背景资料
摘要 脂氧合酶是动植物体内催化脂质降解的关键酶,也是茉莉酸合成途径的第一个关键酶。以先前克隆到的水稻种子脂氧合酶基因OsLOX1全长cDNA为模板,用含有特异酶切位点的P1、P2为引物,通过PCR方法将它构建到大肠杆菌表达载体pET30a(+)上并转化到大肠杆菌菌株BL21(DE3)中,获得相应的重组工程菌。经过20℃条件下的IPTG诱导,OsLOX1重组蛋白在BL21(DE3)菌株中得到表达,经生化特性分析,发现该重组蛋白具有LOX催化活性,其最适pH和温度分别为4.8和30℃。该重组子可进一步应用于体外生产茉莉酸和研究植物种子LOX结构与功能的关系。
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汪仁
沈文飚
江玲
刘玲珑
翟虎渠
万建民
关键词水稻种子   脂氧合酶   原核表达   纯化   鉴定     
Abstract: Lipoxygenase(LOX,EC 1.13.11.12) is a key enzyme during the degradation of lipids in animals and even plants.It is also the first key enzyme responsible for the biosynthesis of jasmonate.In this paper,the expression,purification and characterization ofOsLOX1 were reported.The entire coding region of theOsLOX1 gene was inserted into an expression vector pET30a(+) and transformed into Escherichia coli: BL21(DE3).The fusion protein was successfully expressed induced by IPTG and the purified recombinant protein was obtained with His·Bind○R Kits.Further assay showed that the purified recombinant protein exhibited the LOX activity.The optimum pH and temperature of above enzyme were 4.8(acetate buffer) and 30℃,respectively.Thus,this recombinant might confer an available usage for the synthesis of jasmonate in vitro,and also provide a possibility for elucidating the inter-relationship between the primary structure of the plant seed lipoxygenase protein and its physiological functions.
Key wordsrice seed   lipoxygenase   prokaryotic expression   purification   characterization   
收稿日期: 1900-01-01;
引用本文:   
汪仁, 沈文飚, 江玲等. 水稻种子脂氧合酶基因OsLOX1的原核表达、纯化及鉴定[J]. 中国水稻科学, 2008, 22(2): 118-124 .
WANG Ren ,SHEN Wen-biao ,JIANG Ling et al. Prokaryotic Expression,Purification and Characterization of a Novel Rice Seed Lipoxygenase Gene OsLOX1[J]. , 2008, 22(2): 118-124 .
 
没有本文参考文献
[1] 刘国坤, 王玉, 肖顺, 张绍升*. 水稻根结线虫病的病原鉴定及其侵染源的研究[J]. 中国水稻科学, 2011, 25(4): 420-426.
[2] 王 玲,刘连盟,傅 强,黄世文. 新霉素磷酸转移酶基因nptⅡ的原核表达、蛋白纯化及其活性鉴定[J]. 中国水稻科学, 2011, 25(3): 326-330 .
[3] 陈夕军, ,刘晓维,左示敏,童蕴慧,潘学彪,徐敬友, . 水稻多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因(Ospgip1)原核表达及编码产物生物信息学分析[J]. 中国水稻科学, 2011, 25(2): 136-142 .
[4] 章松柏, 罗汉刚, 张求东, 张长青, 吴祖建 , 谢联辉. 湖北发生的水稻矮缩病是南方水稻黑条矮缩病毒引起的 [J]. 中国水稻科学, 2011, 25(2): 223-226 .
[5] 陈树林,王海燕,丁震乾,王秀娥 ,陈忠明,. 2个杂交籼稻和2个粳稻品种SSR指纹图谱的构建及双重PCR技术的初步研究[J]. 中国水稻科学, 2011, 25(1): 19-24 .
[6] 宋爱梅,黄新朋,孙淑斌,张亚丽,徐国华. 氮高效水稻品种苗期耐低磷种质的筛选与鉴定[J]. 中国水稻科学, 2010, 24(5): 479-486 .
[7] 刘连盟,王玲,黄雯雯,刘恩勇,黄世文. 水稻稻曲病菌G蛋白β亚基基因的克隆、表达与序列分析[J]. 中国水稻科学, 2010, 24(4): 353-359 .
[8] 程建峰,蒋海燕,刘宜柏,戴廷波,曹卫星 . 氮高效水稻基因型鉴定与筛选方法的研究[J]. 中国水稻科学, 2010, 24(2): 175-182 .
[9] 欧阳元龙,吴建祥,熊如意,周益军,周雪平. 水稻黑条矮缩病病毒外壳蛋白基因S10的原核表达、多克隆抗体制备及应用[J]. 中国水稻科学, 2010, 24(1): 25-30 .
[10] 李刚,邓其明,万映秀,李双成肖勇周鹏王世全李 平. 稻米淀粉理化特性相关的水稻淀粉分支酶基因标记开发[J]. 中国水稻科学, 2008, 22(6): 564-564~570 .
[11] 鄂志国,张丽靖,焦桂爱,程本义,王磊,. 稻瘟病抗性基因的鉴定及利用进展[J]. 中国水稻科学, 2008, 22(5): 533-540 .
[12] 徐丽慧,邱文,张唯一,李斌,谢关林. 水稻细菌性褐条病病原的鉴定[J]. 中国水稻科学, 2008, 22(3): 302-306 .
[13] 刘南南,江玲,张文伟,刘玲珑,翟虎渠,万建民. 水稻种胚LOX3基因在逆境胁迫中的作用[J]. 中国水稻科学, 2008, 22(1): 8-14 .
[14] 罗金燕, 徐福寿,王平,徐丽慧,谢关林, . 水稻细菌性谷枯病病原菌的分离鉴定[J]. 中国水稻科学, 2008, 22(1): 82-86 .
[15] 黄世文,王玲,王全永,唐绍清,鄂志国,王磊. 一份抗纹枯病水稻品种ZH5的抗病虫特性和生物学性状[J]. 中国水稻科学, 2007, 21(6): 657-663 .
[16] 杨空松,陈小荣,傅军如,朱昌兰,彭小松,贺晓鹏,贺浩华. 东乡野生稻育性恢复性的鉴定与遗传分析[J]. 中国水稻科学, 2007, 21(5): 487-492 .
[17] 张珏锋,吴鸿,陈建明,郑许松,陈列忠,俞晓平,. 一株褐飞虱内共生菌的分离及分子鉴定[J]. 中国水稻科学, 2007, 21(5): 551-554 .
[18] 姜华,万佳,高晓玲,陈静,汪旭东,徐正君. 水稻愈伤组织中脱落酸特异诱导蛋白的纯化及分析[J]. 中国水稻科学, 2006, 20(6): 583-588 .
[19] 庄杰云, 施勇烽 ,应杰政,鄂志国,曾瑞珍,陈洁,朱智伟. 中国主栽水稻品种微卫星标记数据库的初步构建[J]. 中国水稻科学, 2006, 20(5): 460-468 .
[20] 应杰政,施勇烽,庄杰云,薛庆中,. 应用微卫星标记评估我国水稻主栽品种的一致性[J]. 中国水稻科学, 2006, 20(4): 367-371 .
[21] 肖小余, 王玉平, 张建勇, 李仕贵, 荣廷昭. 四川省主要杂交稻亲本的SSR多态性分析和指纹图谱的构建与应用[J]. 中国水稻科学, 2006, 20(1): 1-7 .
[22] 李斌,谢关林,吕意琳,郝晓娟,罗金燕,刘波,李雯. 水稻革兰氏阳性细菌的主要种群结构及对纹枯病和恶苗病菌的拮抗性[J]. 中国水稻科学, 2006, 20(1): 84-88 .
[23] 徐福荣,余腾琼,严红梅,汤翠凤,叶昌荣,梁斌,戴陆园. 水稻特定位颖花结实率作为孕穗开花期耐冷性鉴定指标[J]. 中国水稻科学, 2005, 19(5): 411-416 .
[24] 章琦. 水稻白叶枯病抗性基因鉴定进展及其利用[J]. 中国水稻科学, 2005, 19(5): 453-459 .
[25] 汪得凯,傅亚萍,胡国成,斯华敏,孙宗修. 水稻茎秆螺旋突变体ts-ta的鉴定及其遗传分析[J]. 中国水稻科学, 2005, 19(5): 393-398 .
[26] 林茂松,丁晓帆,王子明,周风明,林娜. 水稻小穗头上的线虫形态特征鉴定[J]. 中国水稻科学, 2005, 19(4): 361-365 .
[27] 施勇烽,应杰政,王磊, 朱智伟,庄杰云. 鉴定水稻品种的微卫星标记筛选[J]. 中国水稻科学, 2005, 19(3): 195-201 .
[28] 辛业芸, 张展, 熊易平, 袁隆平. 应用SSR分子标记鉴定超级杂交水稻组合及其纯度[J]. 中国水稻科学, 2005, 19(2): 95-100 .
[29] 王建飞, 陈宏友, 杨庆利, 姚明哲, 周国安, 张红生,. 盐胁迫浓度和胁迫时的温度对水稻耐盐性的影响[J]. 中国水稻科学, 2004, 18(5): 449-454 .
[30] 沈文飚, 俞伟伟, 汪仁, 江玲, 翟虎渠, 程式华, 万建民,. 胡萝卜素漂白法快速筛选耐储藏水稻品种[J]. 中国水稻科学, 2003, 17(4): 387-389 .
[31] 吴成李秀兰, 邓晓建, 李仁端, 杨志荣,. 一个新的水稻小粒矮秆突变基因的遗传鉴定[J]. 中国水稻科学, 2003, 17(2): 100-104 .
[32] 彭锁堂, 庄杰云, 颜启传, 郑康乐. 我国主要杂交水稻组合及其亲本SSR标记和纯度鉴定[J]. 中国水稻科学, 2003, 17(1): 1-5 .
[33] 何青芳, 陈卫良, 马志超. 枯草芽孢杆菌A30菌株产生的拮抗肽的分离纯化与理化性质研究[J]. 中国水稻科学, 2002, 16(4): 361-365 .
[34] 姚 青, 赖凤香, 张志涛. 水稻抗二化螟特性离体稻株鉴定技术[J]. 中国水稻科学, 2002, 16(4): 385-386 .
[35] 丁效华, 陈跃进, 杨长寿, 卢永根, 张桂权 . 水稻粳型亲籼系亲和性的测定[J]. 中国水稻科学, 2002, 16(4): 366-368 .
[36] 张小明 , 石春海 , 富田 桂 . 粳稻米淀粉特性与食味间的相关性分析[J]. 中国水稻科学, 2002, 16(2): 157-161 .
[37] 葛秀春, 宋凤鸣, 陈永叶, 郑 重. 苯并噻二唑诱发水稻对稻瘟病抗性中防卫相关酶活性的变化[J]. 中国水稻科学, 2002, 16(2): 171-175 .
[38] 汪秀峰, 杨剑波, 向太和, 李 莉, 倪大虎. 一种叶片直接用作PCR扩增的新方法及其应用[J]. 中国水稻科学, 2002, 16(1): 67-70 .
[39] 李 莉,杨剑波,汪秀峰,向太和,吴家道. 利用RAPD和微卫星标记对协优杂交稻及其亲本进行区别与鉴定[J]. 中国水稻科学, 2000, 14(4): 203-207 .
[40] 周元昌,林荔辉,江树业,季彪俊,毛大梅,陈启锋,李维明. 花药培养遗传纯化温敏核不育系培矮64S的效果初步分析[J]. 中国水稻科学, 2000, 14(2): 119-121 .
[41] 戴陆园,叶昌荣,熊建华,王怀义. 稻耐冷性鉴定评价方法[J]. 中国水稻科学, 1999, 13(1): 62-62 .
[42] 邓启云,袁隆平. 光温敏核不育水稻育性稳定性及其鉴定技术研究[J]. 中国水稻科学, 1998, 12(4): 200-206 .
[43] 徐敬友,童蕴慧,潘学彪,王彰明. 水稻叶尖枯病接种技术及品种的抗病性[J]. 中国水稻科学, 1997, 11(1): 47-50 .
[44] 钱 前 ,陈 洪 ,孙宗修 ,朱立煌 . 真、假杂交水稻Ⅱ优63的RAPD鉴定[J]. 中国水稻科学, 1996, 10(4): 241-242 .
[45] 许 聪 ,吴万春 . 海南岛杂草稻的生态考察和鉴定[J]. 中国水稻科学, 1996, 10(4): 247-249 .
[46] 陈报章, 王象坤. 水稻颖壳硅石的初步研究及其意义[J]. 中国水稻科学, 1995, 9(4): 242-244 .
[47] 傅 强, 陈 伟, 张志涛. 分蘖筛选技术在稻工程苗抗褐飞虱特性评价中的应用[J]. 中国水稻科学, 1994, 8(4): 247-249 .
[48] 焦德茂,顾行影,季本华,张春来. 水稻耐光氧化种质资源的简易筛选、鉴定技术[J]. 中国水稻科学, 1991, 5(3): 133-136 .
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